PCR實驗室標(biāo)準(zhǔn)

基因擴(kuò)增實驗又稱PCR實驗，其特點是能將微量的DNA大幅增加，PCR是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法,廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域，如：檢驗艾滋病、乙型肝炎、禽疫病，癌基因的檢測和診斷，DNA指紋、個體識別、親子鑒別及法醫(yī)物證，動、植物檢疫，動物及其衍生產(chǎn)品檢測，動物飼料、化妝品、食品衛(wèi)生檢測，轉(zhuǎn)基因作物與轉(zhuǎn)基因微生物檢測等。
 
PCR設(shè)計依據(jù)
《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床基因擴(kuò)增管理法》
《生物安全實驗室建筑技術(shù)規(guī)范》 GB50346-2004
《潔凈廠房設(shè)計規(guī)范》GB50073-2001
《高效空氣過濾器》GB13554-92
《實驗室生物安全通用要求》GB19489-2004
《微生物和生物醫(yī)學(xué)實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》WS233-2002 中華人民共和國衛(wèi)生部
 
PCR實驗室平面布局
基因擴(kuò)增實驗室又稱PCR實驗室，實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域，前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等，只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，即從試劑準(zhǔn)備區(qū)->樣品處理區(qū)->擴(kuò)增區(qū)->擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)，不得逆向流動。實驗室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動。各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)置緩沖間，工作間與緩沖間之間宜安裝連鎖裝置。不同功能的核酸檢驗工作區(qū)應(yīng)是分隔獨立的工作室，并有明顯的標(biāo)志，各區(qū)間不能直通。各區(qū)之間如果是緊密相連，需安裝物品傳遞窗。每個工作區(qū)域的頂部應(yīng)安裝紫外燈，紫外燈的波長為254 nm，安裝數(shù)量為每20 m2安裝一支40W的紫外燈。
 
實驗室較為理想的布局模式為有一個專用走廊，試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)很規(guī)范地排列在一起，前三個區(qū)各有一個緩沖間，可供換工作服和工作鞋使用，頂上可裝一紫外燈。內(nèi)實驗區(qū)域設(shè)為正壓或常壓狀態(tài)，緩沖間內(nèi)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)（可上設(shè)一抽風(fēng)裝置），使這三個區(qū)的空氣流向為由實驗區(qū)域內(nèi)向外，緩沖間內(nèi)通向內(nèi)實驗室和走廊的門可安裝一種連鎖裝置，當(dāng)一個門打開時，另一門必須處于關(guān)閉狀態(tài)，防止出現(xiàn)兩個門同時打開的情況。產(chǎn)物分析區(qū)可不設(shè)緩沖間，但應(yīng)設(shè)為負(fù)壓狀態(tài)（裝一個排風(fēng)扇即可），使空氣流向由外向內(nèi)，以防止擴(kuò)增產(chǎn)物的隨空氣流出。每一區(qū)域都須有明確的標(biāo)記，工作按試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)至產(chǎn)物分析區(qū)單一流向進(jìn)行，各區(qū)的儀器設(shè)備包括工作服、鞋、實驗記錄本和筆等都必須專用。
如果無法作到以上模式，以下基本要求必須做到：
1.四個區(qū)域必須是相互獨立的；
2.各區(qū)的儀器設(shè)備及各種物品必須是專用的；
3.各區(qū)完全獨立，緩沖間可有可無。如為一個區(qū)套一個區(qū)的模式，區(qū)間不能直通，應(yīng)有緩沖間，供換工作服及鞋子用，并保證兩個區(qū)域間始終處于完全的分隔狀態(tài)；
4.產(chǎn)物分析區(qū)應(yīng)安裝排風(fēng)扇或其它抽風(fēng)裝置，維持負(fù)壓。
 
實驗室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計及壓力控制
各個區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。PCR實驗室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個實驗區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實驗區(qū)的壓力要求。
 
實驗室裝修
實驗室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。